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兔瘟病毒一步法RT-PCR诊断试剂盒说明书(20次) | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
作者:佚名 文章来源:本站原创 点击数 更新时间:2010-8-5 9:48:40 文章录入:lxj 责任编辑:lxj | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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【注意】 用前请认真阅读注意事项。 【用途】 用于兔瘟病毒病的检测、诊断和流行病学调查。 【试剂】
【操作步骤】 1.RNA提取 (1)取疑似兔瘟病毒病的病料(肝、脾脏等)1~ (2)取200uL上清液(或T),移入1.5mL灭菌EP管中,加入400uLSR-I,反复颠倒几次混匀,室温放置5~10分钟。 (3)加入180uL氯仿,漩涡振荡15秒混匀。室温下放置2~3分钟。 (4)12000r/min离心10分钟,取上层水相(切忌,勿吸到两相之间的杂质),转移到一个新的EP管中,再加入等体积的异丙醇混匀,室温放置10分钟。 (5)12000r/min离心10分钟,弃去上清,加入SR-II 700uL,充分洗涤沉淀RNA后,12000r/min离心5分钟,小心吸去上清(注意:严格防止RNA丢失)。 (6)用洁净吸水纸吸干管壁的SR-II,室温放置2~3分钟。用20uLTU-5溶解,即为模板,即用或 2.One-Step RT- PCR加样体系
3.反应程序 4.电泳 称量 1 2
1.每次使用,开盖之前请先瞬时离心,使试剂沉于管底。 2.本试剂盒为20头份量诊断试剂,操作失误或移液器不准确造成最终剂量不够情况,不予负责。 3.所有试剂在要求温度下保存, 4.尽量建立PCR试验操作区,避免交叉污染,RNA抽提严格防止RNA酶污染,要求戴一次性塑料手套,并经常更换。 5.加样和反应程序严格按照说明书进行,由于操作失误、移液器不精确、定时不准确造成无结果情况,不予负责。 6. 吸头、离心管和PCR管在使用前,最好用DEPC水(0.1%)处理,然后高压灭菌后烘干,操作过程尽量不要用手接触,可用镊子夹取。 7.注意防止试剂污染,在有效期限前用完。 8. TU-8所装试剂为致癌物质,避免接触到皮肤。如若不甚接触,请立即用洗涤剂清洗。 【有效期】 本制品有效期为1年,生产日期见包装内侧。 【联系人】 管宇、王金良 电话:0543-3403060 |
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