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非洲猪瘟毒病PCR诊断试剂盒说明书 (10次) | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
作者:佚名 文章来源:本站原创 点击数 更新时间:2011-8-22 9:29:32 文章录入:admin 责任编辑:admin | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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【用途】 用于非洲猪瘟病毒的检测、诊断和流行病学调查。 【试剂】
【操作步骤】 1. 病料处理 取适量病料肾脏、淋巴结、脾脏、肺脏等组织,于灭菌研钵充分研磨,用生理盐水(或PBS)液按照1:3稀释成均匀乳剂, 2 . DNA的抽提 (1) 取已冻融好的病料8000r/min离心5min,取上清500μl,加50μl SR-I和6μl SR-II, (2) 加入等量酚:氯仿(1:1),漩涡振荡20秒, (3) 取上清,加入等量氯仿,振荡混匀, (4) 取400μl 上清,加入800μl无水乙醇,再加40μl SR-III,混匀。 3 .PCR操作 加样体系:(将下列试剂加入0.5mLPCR反应管中,最好在冰浴条件下加样,以T为阳性模板对照。)
反应条件:
4.电泳: 称量 【结果判定】 在约429bp位置出现扩增带,实验结果为阳性(如图)。 1.标准阳性片段 2.阴性对照 M.DL2000 Marker
【注意事项】 1. 每次使用,开盖之前请先瞬时离心,使试剂沉于管底。 2. 本试剂盒为10头份量试剂,操作失误或移液器不准确造成最终剂量不够情况,不予负责。 3. 所有试剂在要求温度下保存, 4. 尽量建立PCR试验分区操作,避免交叉污染。 5. 加样和反应程序严格按照说明书进行,由于操作失误、移液器不精确、定时不准确造成无结果情况,不予负责。 6. 吸头、离心管和PCR管在使用前,要高压灭菌,操作过程尽量不要用手接触到管内壁,可用镊子夹取。 7. 注意防止试剂污染,在有效期限前用完。 8. TU-9所装试剂为致癌物质,避免接触到皮肤。如若不甚接触,请立即用洗涤剂清洗。 【保存期】 本制品有效期为1年,生产日期见盒盖内侧。 【联系人】王金良、 管宇 电话:0543-3403060 仅供兽医诊断使用 |
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